Hvordan holde cellene sunne

Grunnleggende betingelser for cellekultur

1. Egnet cellekulturmedium

Et egnet cellekulturmedium er en av de viktigste betingelsene for cellevekst og spredning in vitro. Kulturmediet gir ikke bare cellenæring og grunnleggende stoffer for å fremme cellevekst og spredning, men gir også et levemiljø for vekst og reproduksjon av dyrkede celler.

2. Serum av høy kvalitet

For tiden krever de fleste syntetiske medier tilsetning av serum. Serum er en av de viktigste komponentene i cellekulturmediet, og inneholder en rekke vekstfaktorer og andre næringsstoffer som kreves for cellevekst.

3. Konstant celleveksttemperatur

For å opprettholde den kraftige veksten av dyrkede celler, må det være en konstant og passende temperatur.

4. Egnet gassmiljø

Gass er en av de nødvendige betingelsene for overlevelse av pattedyrceller, og de nødvendige gassene er hovedsakelig oksygen og karbondioksid.

5. Cellekulturtemperatur

For å opprettholde den kraftige veksten av dyrkede celler, må det være en konstant og passende temperatur. Ulike typer celler har ulike krav til kulturtemperatur. Standardtemperaturen for human cellekultur er 36,5 grader ± 0,5 grader. Avvik fra dette temperaturområdet vil påvirke den normale metabolismen av celler og til og med dø.

6. Egnet gassmiljø

Gass er en av de nødvendige betingelsene for overlevelse av pattedyrcellekultur, og de nødvendige gassene er hovedsakelig oksygen og karbondioksid. Oksygen deltar i trikarboksylsyresyklusen, produserer energi for cellevekst og spredning og syntetiserer ulike komponenter som trengs for cellevekst.

u=747832771,3882033285&fm=253&fmt=auto&app=138&f=JPEG.webp

Vanlig forurensning av cellekultur

1. Bakteriell forurensning

Bakteriell forurensning er den vanligste. Når operasjonen er litt feil, vil det føre til celleforurensning. Etter bakteriell forurensning vil det fremstå som svarte tynne strimler av sand når det observeres under mikroskop. Stangformet osv. For det andre blir kulturmediet gult og grumset, og fine sandformede sedimenter kan tydelig sees i petriskålen, og det lukter rart fra tid til annen.

2. Soppforurensning

Den soppkontaminerte kulturløsningen er klar og gjennomsiktig, ikke som et stort utbrudd av bakteriell infeksjon, så det er vanskelig å oppdage det tidlig. Noen ganger ser det ut som en filament under mikroskopet, noen ganger ser det ut som en korall, og sakte vil en veldig tynn svart filament vokse. Dette Når det er for sent, er det vanskelig for cellene å bli reddet.

src=http___bbsatt.yineitong.com_forum_day_121229_12122916188d4df9f9f4f6e36a&refer=http___bbsatt.yineitong.webp.jpg

3. Muggforurensning

I samsvar med soppinfeksjoner, fordi kulturmediet er klart, er soppforurensning vanskelig å oppdage tidlig, når det ofte er for sent. Flokkulerende urenheter dukket sakte opp i kulturmediet, og filamentøse masseflytende gjenstander kunne sees under mikroskopet, som rakler i vinden. Celler kan fortsatt vokse, men over tid forringes cellene og slutter å vokse.

3(1)

4. Mykoplasmainfeksjon

Kulturmediet blir grumsete. Etter at mykoplasma infiserer cellene, er ikke de cytopatiske endringene tydelige, men celletilstanden blir verre og veksten avtar. Det kan være små svarte flekker under mikroskopet, men dyrkingsmediet er generelt ikke grumset. Etter at cellene var passert, dukket det opp intercellulære svarte flekker, cellene ble vakuolert, og mange celler lignet apoptose og nekrose. Til slutt fløt cellene og døde helt.

Forebygging av celleforurensning

Etablering av gode regler og forskrifter kan bidra langt for å redusere celleforurensning. Inkludert tilgangssystem, driftsnormer og daglig styringssystem.

Tilgangssystem: inkludert personell og materiell. Personell må opplæres før de kan operere selv, og de må oppfylle brukskravene før de går inn i laboratoriet, for eksempel hvite frakker, isolasjonskjoler, masker, hansker, osv. For gjenstandene som trengs, bør ikke-engangsartikler være strengt tatt sterilisert og sterilisert, og innkjøpte varer må kjøpes fra vanlige og pålitelige kanaler. Nyinnkjøpte celler bør testes og verifiseres før bruk.

Driftsspesifikasjoner: Det er best å formulere spesifikasjoner for rutinemessige operasjoner, og laboratoriepersonell må følge driftsspesifikasjonene, som ikke kan endres etter eget ønske, og også dyrke gode driftsvaner for laboratoriepersonell. For eksempel, etter at pipettespissen er sugd, vil den ikke trekkes inn i mediet for andre gang, og en tilstrekkelig mengde medium vil bli sugd én gang. Ved tilsetning av væske bør væsken tilsettes i suspensjon så mye som mulig, noe som effektivt kan forhindre mykoplasmaforurensning og cellekrysskontaminering. I tillegg, hvis mulig, må du bare bruke én cellelinje om gangen, og det er bedre å ha et lite tidsintervall mellom cellene for å unngå krysskontaminering.

Daglig styringssystem: Det inkluderer regler og metoder for bruk, rengjøring og vedlikehold av miljøet og forbruksvarer, reagenser osv. Det er også styring av forbruk, lager og innkjøp av reagenser og forbruksvarer, inkludert to-nivå lagerstyring av celleprøver. For forurensningskildene som ikke er enkle å finne, er det best å gjennomføre regelmessige tester, hovedsakelig mykoplasmaforurensning og cellekrysskontaminering.

BKMAM Bio leverer tilsvarende forbruksvarer for cellekultur:

Engangs plast runde/firkantede petriskåler:

Høyt gjennomsiktig polystyrenmateriale (PS);

Overflaten er glatt og flat, og det er ingen optisk forvrengning av celler under mikroskopobservasjon;

Stabledesign gjør stabling og lagring enklere;

Etylenoksidsterilisering (EO);

Slitasje- og korrosjonsbestandighet.

_20210127150045